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使用液相色譜過程中需要密切注意柱壓問題

點擊次數:2450 發(fā)布時間:2018-08-23
  柱壓問題是使用液相色譜過程中需要密切注意的地方,柱壓的穩(wěn)定與色譜圖峰形的好壞、柱效、分離效果及保留時間等密切相關。所謂柱壓穩(wěn)定并不是指壓力值穩(wěn)定于一個恒定值而是指壓力波動范圍在50PSI(3.3 Bar)之間(在使用梯度洗脫時,柱壓平穩(wěn)緩慢的變化是允許的)。壓力過、過低都屬于柱壓問題。
  1. 壓力過 這是液相在使用中常見的問題,指的是壓力突然升,一般都是由于流路中有堵塞的原因。此時,我們應該分段進行檢查。
  (1).首斷開真空泵的入口處,此時PEEK管里充滿液體,使PEEK管低于溶劑瓶,看液體是否自由滴下,如果液體不滴或緩慢滴下,則是溶劑過濾頭堵塞。處理方法:用30%的硝酸浸泡半個小時,在用純水沖洗干凈。如果液體自由滴下,溶劑過濾頭正常,在檢查;
  (2).打開Purge閥,使流動相不經過柱子,如果壓力沒有明顯下降,則是過濾白頭堵塞。處理方法:將過濾白頭取出,用10%的異丙醇聲半個小時。如果壓力降至100PSI (6.7 Bar)以下,過濾白頭正常,在檢查;
  (3).把色譜柱出口端取下,如果壓力不下降,則是柱子堵塞。處理方法:如果是緩沖鹽堵塞,則用95%的水沖至壓力正常。如果是一些保留的物質導致堵塞,則要用比現在流動相更的流動相沖至壓力正常。假如按上面的方法長時間沖洗壓力都不下降,則可考慮將柱子的進出口反過來接在儀器上,用流動相沖洗柱子。這時,如果柱壓仍不下降,只有換柱子入口篩板,但一旦操作不甚,容易造成柱效下降,所以盡量少用。
  2.壓力過低壓力過低的現象一般是由于系統(tǒng)泄漏,處理方法:尋找各個接口處,是色譜柱兩端的接口,把泄漏的地方旋緊即可。當然還有一個原因就是泵里進了空氣,但此時表現的往往是壓力不穩(wěn),忽忽低,更嚴重一點會導致泵無法吸上液體。處理方法:打開Purge閥,用3~5ml/min的流速沖洗,如果不行,則要用針筒在排空閥處借住外力將氣泡吸出。

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